Zgryźliwość kojarzy mi się z radością, która źle skończyła.
CHOLESTEROL HDL DIRECT
Nr kat. 11557 1 x 80 mL
PRZECHOWYWAĘ W TEMP. 2-8»C
Odczynniki do pomiaru stħŇenia cholesterolu HDL
Tylko do uŇytku in vitro w laboratorium klinicznym
CHOLESTEROL HDL
METODA BEZPOĺREDNIA
DETERGENT
ZASADA METODY
Cholesterol z lipoprotein niskiej għstoĻci (LDL), lipoprotein bardzo niskiej għstoĻci (VLDL) i
chylomikronw rozkþadany jest przez oksydazħ cholesterolowĢ w przyĻpieszonej reakcji nie
wytwarzajĢcej zabarwienia. Detergent obecny w odczynniku B rozpuszcza cholesterol z
lipoprotein wysokiej għstoĻci (HDL) w prbce. Cholesterol HDL jest nastħpnie mierzony
spektrofotometrycznie w oparciu o sprzħŇone reakcje opisane poniŇej
1
.
WARTO
ĺ
CI REFERENCYJNE
StħŇenia cholesterolu HDL podlegajĢ znacznym zmianom w zaleŇnoĻci od wieku i pþci.
NastħpujĢce wartoĻci graniczne zalecono do diagnozy osb o wysokim ryzyku wystĢpienia
choroby wieıcowej
2
.
Do 35 mg/dL = 0.91 mmol/L
Wysokie ryzyko
esteraza chol.
> 60 mg/dL = > 1.56 mmol/L
Niskie ryzyko
Estry cholesterolu + H
2
O Cholesterol + Kwasy tþuszczowe
oksydaza chol.
peroksydaza
KONTROLA JAKO
ĺ
CI
W celu weryfikacji wykonania procedury oznaczenia zaleca siħ uŇywanie lipidowej surowicy
kontrolnej poziom I (nr kat. 18040) i poziom II (nr kat. 18041) lub surowicy kontrolnej
biochemicznej ludzkiej poziom I (nr kat. 18042) i II (nr kat. 18043)
KaŇde laboratorium powinno ustalię wþasny, wewnħtrzny system kontroli jakoĻci i procedur
naprawczych jeŇeli wartoĻci kontrolne nie mieszczĢ siħ w zakresie dopuszczalnych tolerancji.
Cholesterol + ď O
2
+ H
2
O Cholestenon + H
2
O
2
2 H
2
O
2
+ 4-Aminoantypiryna + DSBmT Chinonoimina + 4 H
2
O
ZAWARTO
ĺĘ
OPAKOWANIA I SKŁAD
A. Odczynnik. 1 x 60 mL. Bufor GoodÓa, oksydaza cholesterolowa
<
1 U/mL, peroksydaza
<
1
U/mL, N,N-bis(4-sulfobutylo)-m-toluidyna (DSBmT) 1 mmol/L, akcelerator 1 mmol/L.
B. Odczynnik. 1 x 20 mL. Bufor GoodÓa, esteraza cholesterolowa
<
1.5 U/mL, 4- aminoantypiryna
1 mmol/L , oksydaza askorbinianowa < 3.0 KU/L, detergent.
PRZECHOWYWANIE
Przechowywaę w temp. 2-8»C.
Odczynniki sĢ stabilne do daty waŇnoĻci podanej na etykiecie, jeŇeli sĢ szczelnie zamkniħte oraz
jeŇeli nie dopuĻci siħ do ich zanieczyszczenia podczas uŇycia.
Oznaki zepsucia: ObecnoĻę zawiesiny, zmħtnienie.
ODCZYNNIKI DODATKOWE
Kalibrator biochemiczny (ludzki) (BioSystems kod 18044) lub kalibrator HDL/LDL (BioSystems
kod 11693).
S. Kalibrator do Cholesterolu HDL/LDL: (Nr kat. 11693). Surowica ludzka. StħŇenie podane jest
na etykiecie. RozpuĻcię w 1.0 mL wody destylowanej. Roztwr jest stabilny przez 1 tydzieı w
temp. 2-8»C lub przez 2 miesiĢce w temp. -18»C, jeĻli zostaþ zamroŇony w dozach. StħŇenie
jest wyznaczane zgodnie z referencyjnymi procedurami pomiarowymi CDC (Centers for
Disease Control and Prevention).
Skþadniki pochodzenia ludzkiego zostaþy poddane badaniom na obecnoĻę przeciwciaþ HIV i HCV
oraz antygenu HBs. Pomimo ujemnych wynikw testw powinny byę uŇywane z ostroŇnoĻciĢ i
traktowane jako potencjalnie zakaŅne.
PRZYGOTOWANIE ODCZYNNIKÓW
Odczynniki sĢ gotowe do uŇycia.
WYPOSA
ņ
ENIE DODATKOWE
−
Termostatowana þaŅnia wodna o temp. 37»C.
−
Analizator, spektrofotometr lub fotometr z gniazdem pomiarowym termostatowanym na 37»C i
filtrem o (gþwnej) dþugoĻci fali 600
±
20 nm i (referencyjnej) 700 nm
±
20 nm.
MATERIAŁ DO BADA
İ
Surowica pobrana zgodnie ze standardowymi procedurami.
Cholesterol HDL w surowicy lub osoczu jest stabilny przez 7 dni w temp. 2-8»C. EDTA, heparyna
litowa lub sodowa mogĢ byę uŇywane jako antykoagulanty.
WYKONANIE OZNACZENIA
1. Doprowadzię odczynniki i fotometr do temp. 37»C.
2. Odpipetowaę do kuwety: (Uwagi 1 i 2)
CHARAKTERYSTYKA METROLOGICZNA
−
Granica detekcji: 0.5 mg/dL = 0.01 mmol/L.
−
Granica liniowoĻci: 200 mg/dL = 5.18 mmol/L.
−
PowtarzalnoĻę (wewnĢtrzseryjna):
ĺrednie stħŇenie
CV
n
32.9 mg/dL = 0.85 mmol/L
0.8 %
20
50.6 mg/dL = 1.31 mmol/L
0.5 %
20
−
OdtwarzalnoĻę (miħdzyseryjna):
ĺrednie stħŇenie
CV
n
32.8 mg/dL = 0.85 mmol/L
1.3 %
40
50.0 mg/dL = 1.30 mmol/L
1.5 %
40
−
PoprawnoĻę: Wyniki uzyskane przy uŇyciu tego odczynnika nie wykazaþy rŇnic
systematycznych w porwnaniu z odczynnikami referencyjnymi. Szczegþy eksperymentw
porwnawczych dostħpne sĢ na Ňyczenie.
−
Interferencje: Hemoglobina (10 g/L), lipemia (triglicerydy 18 g/L) i bilirubina (60 mg/dL) nie
interferujĢ. Inne leki i substancje mogĢ interferowaę.
Podana charakterystyka metrologiczna zostaþa uzyskana w przypadku uŇycia analizatora. Wyniki
mogĢ rŇnię siħ przy uŇyciu innego aparatu lub w procedurze manualnej.
CHARAKTERYSTYKA DIAGNOSTYCZNA
HDL odgrywa waŇnĢ rolħ w usuwaniu cholesterolu z tkanek i jego transporcie do wĢtroby celem
dalszego usuniħcia do kwasw Ňþciowych.
ObniŇone stħŇenie cholesterolu HDL w osoczu ma zwiĢzek z zachorowaniami na miaŇdŇycħ
naczyı i zawaþem miħĻnia sercowego oraz udarem mzgu
4,5
.
Istnieje kilka stanw chorobowych oraz wpþyww Ļrodowiskowych zwiĢzanych z obniŇonym
poziomem cholesterolu HDL: ostre lub przewlekþe choroby wĢtroby, doŇylna hiperalimentacja,
powaŇne niedoŇywienie, cukrzyca, przewlekþa anemia, zespoþy mieloproliferacyjne, choroba
tangierska, alfalipoproteinemia, dotkliwy stres, niektre leki i palenie tytoniu
4,5
.
Diagnoza kliniczna nie powinna byę stawiana na podstawie wynikw pojedynczego badania, ale
powinna þĢczyę zarwno dane kliniczne jak i laboratoryjne.
UWAGI
1. ObjħtoĻę prby badanej i odczynnika moŇna zmieniaę, ale pod warunkiem zachowania tego
samego stosunku.
2. Odczynniki te mogĢ byę stosowane w analizatorach automatycznych. Aplikacje do wielu z
nich dostħpne sĢ na Ňyczenie.
BIBLIOGRAFIA
1. Warnick GR Nauck M, , Rifai N. Evolution of methods for measurement of HDL-cholesterol:
from ultracentrigutaion to homogeneous assays.
Clin Chem 2001; 47: 1579-96.
2. National Cholesterol Education Program Expert Panel. Third report of the National Cholesterol
Education Program (NCEP) Expert Panel on Detection, Evaluation, and Treatment of High
Blood Cholesterol in Adults (ATP III). NIH Publication. Bethesda: National Heart, Lung, and
Blood Institute; 2001.
3. Young DS. Effects of drugs on clinical laboratory tests, 5th ed. AACC Press, 2000.
4. Tietz Textbook of Clinical Chemistry and Molecular Diagnostics, 4th ed. Burtis CA, Ashwood
ER, Bruns DE. WB Saunders Co, 2005.
5. Friedman and Young. Effects of disease on clinical laboratory tests, 4th ed. AACC Press,
2001.
Odczynnik A 750 ¸Z
Surowica/Kalibrator 7 ¸Z
3. Wymieszaę i wþoŇyę kuwetħ do fotometru. RozpoczĢę pomiar czasu. Po 5 minutach odczytaę
absorbancjħ (A
1
) przy 600/700 nm wobec wody destylowanej.
4. Odpipetowaę do kuwety:
Odczynnik B
250 ´L
Wymieszaę.
5. Po 5 minutach odczytaę absorbancjħ (A
2
) przy 600/700 nm.
OBLICZENIA
StħŇenie cholesterolu HDL oblicza siħ przy zastosowaniu poniŇszego oglnego wzoru:
(A
2
-A
1
)
Prbki
(A
2
-A
1
)
Kalibratora
x C
Kalibratora
= C
Prbki
M11557po-18
BioSystems S.A.
Costa Brava, 30. 08030 Barcelona (Spain)
01/2014
Quality System certified according to
EN ISO 13485 and EN ISO 9001 standards
Licensed under PCT/JP00/03860, PCT/JP97/04442
zanotowane.pl doc.pisz.pl pdf.pisz.pl hannaeva.xlx.pl
Nr kat. 11557 1 x 80 mL
PRZECHOWYWAĘ W TEMP. 2-8»C
Odczynniki do pomiaru stħŇenia cholesterolu HDL
Tylko do uŇytku in vitro w laboratorium klinicznym
CHOLESTEROL HDL
METODA BEZPOĺREDNIA
DETERGENT
ZASADA METODY
Cholesterol z lipoprotein niskiej għstoĻci (LDL), lipoprotein bardzo niskiej għstoĻci (VLDL) i
chylomikronw rozkþadany jest przez oksydazħ cholesterolowĢ w przyĻpieszonej reakcji nie
wytwarzajĢcej zabarwienia. Detergent obecny w odczynniku B rozpuszcza cholesterol z
lipoprotein wysokiej għstoĻci (HDL) w prbce. Cholesterol HDL jest nastħpnie mierzony
spektrofotometrycznie w oparciu o sprzħŇone reakcje opisane poniŇej
1
.
WARTO
ĺ
CI REFERENCYJNE
StħŇenia cholesterolu HDL podlegajĢ znacznym zmianom w zaleŇnoĻci od wieku i pþci.
NastħpujĢce wartoĻci graniczne zalecono do diagnozy osb o wysokim ryzyku wystĢpienia
choroby wieıcowej
2
.
Do 35 mg/dL = 0.91 mmol/L
Wysokie ryzyko
esteraza chol.
> 60 mg/dL = > 1.56 mmol/L
Niskie ryzyko
Estry cholesterolu + H
2
O Cholesterol + Kwasy tþuszczowe
oksydaza chol.
peroksydaza
KONTROLA JAKO
ĺ
CI
W celu weryfikacji wykonania procedury oznaczenia zaleca siħ uŇywanie lipidowej surowicy
kontrolnej poziom I (nr kat. 18040) i poziom II (nr kat. 18041) lub surowicy kontrolnej
biochemicznej ludzkiej poziom I (nr kat. 18042) i II (nr kat. 18043)
KaŇde laboratorium powinno ustalię wþasny, wewnħtrzny system kontroli jakoĻci i procedur
naprawczych jeŇeli wartoĻci kontrolne nie mieszczĢ siħ w zakresie dopuszczalnych tolerancji.
Cholesterol + ď O
2
+ H
2
O Cholestenon + H
2
O
2
2 H
2
O
2
+ 4-Aminoantypiryna + DSBmT Chinonoimina + 4 H
2
O
ZAWARTO
ĺĘ
OPAKOWANIA I SKŁAD
A. Odczynnik. 1 x 60 mL. Bufor GoodÓa, oksydaza cholesterolowa
<
1 U/mL, peroksydaza
<
1
U/mL, N,N-bis(4-sulfobutylo)-m-toluidyna (DSBmT) 1 mmol/L, akcelerator 1 mmol/L.
B. Odczynnik. 1 x 20 mL. Bufor GoodÓa, esteraza cholesterolowa
<
1.5 U/mL, 4- aminoantypiryna
1 mmol/L , oksydaza askorbinianowa < 3.0 KU/L, detergent.
PRZECHOWYWANIE
Przechowywaę w temp. 2-8»C.
Odczynniki sĢ stabilne do daty waŇnoĻci podanej na etykiecie, jeŇeli sĢ szczelnie zamkniħte oraz
jeŇeli nie dopuĻci siħ do ich zanieczyszczenia podczas uŇycia.
Oznaki zepsucia: ObecnoĻę zawiesiny, zmħtnienie.
ODCZYNNIKI DODATKOWE
Kalibrator biochemiczny (ludzki) (BioSystems kod 18044) lub kalibrator HDL/LDL (BioSystems
kod 11693).
S. Kalibrator do Cholesterolu HDL/LDL: (Nr kat. 11693). Surowica ludzka. StħŇenie podane jest
na etykiecie. RozpuĻcię w 1.0 mL wody destylowanej. Roztwr jest stabilny przez 1 tydzieı w
temp. 2-8»C lub przez 2 miesiĢce w temp. -18»C, jeĻli zostaþ zamroŇony w dozach. StħŇenie
jest wyznaczane zgodnie z referencyjnymi procedurami pomiarowymi CDC (Centers for
Disease Control and Prevention).
Skþadniki pochodzenia ludzkiego zostaþy poddane badaniom na obecnoĻę przeciwciaþ HIV i HCV
oraz antygenu HBs. Pomimo ujemnych wynikw testw powinny byę uŇywane z ostroŇnoĻciĢ i
traktowane jako potencjalnie zakaŅne.
PRZYGOTOWANIE ODCZYNNIKÓW
Odczynniki sĢ gotowe do uŇycia.
WYPOSA
ņ
ENIE DODATKOWE
−
Termostatowana þaŅnia wodna o temp. 37»C.
−
Analizator, spektrofotometr lub fotometr z gniazdem pomiarowym termostatowanym na 37»C i
filtrem o (gþwnej) dþugoĻci fali 600
±
20 nm i (referencyjnej) 700 nm
±
20 nm.
MATERIAŁ DO BADA
İ
Surowica pobrana zgodnie ze standardowymi procedurami.
Cholesterol HDL w surowicy lub osoczu jest stabilny przez 7 dni w temp. 2-8»C. EDTA, heparyna
litowa lub sodowa mogĢ byę uŇywane jako antykoagulanty.
WYKONANIE OZNACZENIA
1. Doprowadzię odczynniki i fotometr do temp. 37»C.
2. Odpipetowaę do kuwety: (Uwagi 1 i 2)
CHARAKTERYSTYKA METROLOGICZNA
−
Granica detekcji: 0.5 mg/dL = 0.01 mmol/L.
−
Granica liniowoĻci: 200 mg/dL = 5.18 mmol/L.
−
PowtarzalnoĻę (wewnĢtrzseryjna):
ĺrednie stħŇenie
CV
n
32.9 mg/dL = 0.85 mmol/L
0.8 %
20
50.6 mg/dL = 1.31 mmol/L
0.5 %
20
−
OdtwarzalnoĻę (miħdzyseryjna):
ĺrednie stħŇenie
CV
n
32.8 mg/dL = 0.85 mmol/L
1.3 %
40
50.0 mg/dL = 1.30 mmol/L
1.5 %
40
−
PoprawnoĻę: Wyniki uzyskane przy uŇyciu tego odczynnika nie wykazaþy rŇnic
systematycznych w porwnaniu z odczynnikami referencyjnymi. Szczegþy eksperymentw
porwnawczych dostħpne sĢ na Ňyczenie.
−
Interferencje: Hemoglobina (10 g/L), lipemia (triglicerydy 18 g/L) i bilirubina (60 mg/dL) nie
interferujĢ. Inne leki i substancje mogĢ interferowaę.
Podana charakterystyka metrologiczna zostaþa uzyskana w przypadku uŇycia analizatora. Wyniki
mogĢ rŇnię siħ przy uŇyciu innego aparatu lub w procedurze manualnej.
CHARAKTERYSTYKA DIAGNOSTYCZNA
HDL odgrywa waŇnĢ rolħ w usuwaniu cholesterolu z tkanek i jego transporcie do wĢtroby celem
dalszego usuniħcia do kwasw Ňþciowych.
ObniŇone stħŇenie cholesterolu HDL w osoczu ma zwiĢzek z zachorowaniami na miaŇdŇycħ
naczyı i zawaþem miħĻnia sercowego oraz udarem mzgu
4,5
.
Istnieje kilka stanw chorobowych oraz wpþyww Ļrodowiskowych zwiĢzanych z obniŇonym
poziomem cholesterolu HDL: ostre lub przewlekþe choroby wĢtroby, doŇylna hiperalimentacja,
powaŇne niedoŇywienie, cukrzyca, przewlekþa anemia, zespoþy mieloproliferacyjne, choroba
tangierska, alfalipoproteinemia, dotkliwy stres, niektre leki i palenie tytoniu
4,5
.
Diagnoza kliniczna nie powinna byę stawiana na podstawie wynikw pojedynczego badania, ale
powinna þĢczyę zarwno dane kliniczne jak i laboratoryjne.
UWAGI
1. ObjħtoĻę prby badanej i odczynnika moŇna zmieniaę, ale pod warunkiem zachowania tego
samego stosunku.
2. Odczynniki te mogĢ byę stosowane w analizatorach automatycznych. Aplikacje do wielu z
nich dostħpne sĢ na Ňyczenie.
BIBLIOGRAFIA
1. Warnick GR Nauck M, , Rifai N. Evolution of methods for measurement of HDL-cholesterol:
from ultracentrigutaion to homogeneous assays.
Clin Chem 2001; 47: 1579-96.
2. National Cholesterol Education Program Expert Panel. Third report of the National Cholesterol
Education Program (NCEP) Expert Panel on Detection, Evaluation, and Treatment of High
Blood Cholesterol in Adults (ATP III). NIH Publication. Bethesda: National Heart, Lung, and
Blood Institute; 2001.
3. Young DS. Effects of drugs on clinical laboratory tests, 5th ed. AACC Press, 2000.
4. Tietz Textbook of Clinical Chemistry and Molecular Diagnostics, 4th ed. Burtis CA, Ashwood
ER, Bruns DE. WB Saunders Co, 2005.
5. Friedman and Young. Effects of disease on clinical laboratory tests, 4th ed. AACC Press,
2001.
Odczynnik A 750 ¸Z
Surowica/Kalibrator 7 ¸Z
3. Wymieszaę i wþoŇyę kuwetħ do fotometru. RozpoczĢę pomiar czasu. Po 5 minutach odczytaę
absorbancjħ (A
1
) przy 600/700 nm wobec wody destylowanej.
4. Odpipetowaę do kuwety:
Odczynnik B
250 ´L
Wymieszaę.
5. Po 5 minutach odczytaę absorbancjħ (A
2
) przy 600/700 nm.
OBLICZENIA
StħŇenie cholesterolu HDL oblicza siħ przy zastosowaniu poniŇszego oglnego wzoru:
(A
2
-A
1
)
Prbki
(A
2
-A
1
)
Kalibratora
x C
Kalibratora
= C
Prbki
M11557po-18
BioSystems S.A.
Costa Brava, 30. 08030 Barcelona (Spain)
01/2014
Quality System certified according to
EN ISO 13485 and EN ISO 9001 standards
Licensed under PCT/JP00/03860, PCT/JP97/04442